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納米抗體(Nanobody,Nb)， 即重鏈單域抗體VHH (variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody)，是由比利時科學家于1993年在自然雜志中報道，是駱駝科動物(駱駝，大羊駝，羊駝及其近親物種)缺失輕鏈的天然重鏈抗體的可變區(qū)（VHH）組成的單域抗體，該抗體只包含一個重鏈可變區(qū)（VHH）和兩個常規(guī)的CH2與CH3區(qū)。 VHH晶體為直徑2.5nm、長4nm的圓柱體，分子量只有15 KDa，因此也被稱作納米抗體（Nanobody, Nb）。
圖片來源：International Journal of Nanomedicine 2016:11 3287–3303
得益于納米抗體微小的結(jié)構(gòu)、完整的抗原識別能力以及噬菌體篩選技術(shù)，納米抗體表現(xiàn)出高親合力、高特異性、強穿透性和易于基因改造和表達等特點，并且由于可以獲得抗體完整序列，納米抗體可以通過體外重組表達高質(zhì)量穩(wěn)定生產(chǎn)，有效避免傳統(tǒng)抗體的批次間差異問題。納米抗體的物理和化學穩(wěn)定性，可為診斷和治療提供新的研究工具，在抗體藥物研發(fā)、醫(yī)學基礎(chǔ)研究以及疾病診斷、癌癥和感染性疾病治療等領(lǐng)域展現(xiàn)出了廣闊的應用前景。
與靶點結(jié)合特異性更強
組織穿透力更強
開發(fā)周期短，穩(wěn)定性更高
制備簡單，適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)
可在微生物中高效大量表達
更容易人源化
耀海生物擁有豐富的納米抗體研發(fā)及生產(chǎn)經(jīng)驗，以強大的技術(shù)平臺、先進的生產(chǎn)設(shè)備以及在納米抗體全生態(tài)表達系統(tǒng)的開創(chuàng)性技術(shù)，致力于為客戶提供從菌株構(gòu)建、多功能納米抗體表達與純化，及規(guī)模化生產(chǎn)的一站式納米抗體研發(fā)生產(chǎn)服務，滿足客戶不同實驗或項目需求。
E.coli 原核表達系統(tǒng)
酵母真核表達系統(tǒng)（畢赤酵母）
哺乳動物細胞表達系統(tǒng)
單域納米抗體、二價納米抗體、多價納米抗體
齊全純化平臺，組合式純化方式，高效靈活
納米抗體較高表達量10g/L
服務規(guī)模7-2000L
目前，耀海生物建立了全生態(tài)的納米抗體表達體系，現(xiàn)有的表達系統(tǒng)包括：E.coli 原核表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)（畢赤酵母）、哺乳動物細胞表達系統(tǒng)（科研級樣品制備），熟練運用多種表達宿主菌，根據(jù)客戶的實際需求，為客戶提供適合且高質(zhì)量的表達體系。
大腸桿菌表達系統(tǒng)是基因表達技術(shù)中發(fā)展早、應用廣且經(jīng)濟實惠的經(jīng)典表達系統(tǒng)。大腸桿菌具有遺傳背景清楚、細胞增殖快、表達量高、穩(wěn)定性好和抗污染能力強等特點。
納米抗體的分子質(zhì)量小、結(jié)構(gòu)簡單，能被單個基因編碼，利用基因工程能在大腸桿菌等原核微生物中大量表達。
耀海生物可以利用大腸桿菌在胞質(zhì)或者通過信號肽周質(zhì)空間表達納米抗體，成功表達的納米抗體種類超20種。
酵母表達系統(tǒng)，是工業(yè)生產(chǎn)中應用較為廣泛的系統(tǒng)，其遺傳背景清楚安全，兼具原核和真核表達系統(tǒng)的優(yōu)點：增殖快、可在廉價培養(yǎng)基中進行高密度發(fā)酵、能進行復雜的翻譯后修飾、且分泌表達能力強大，有效降低下游純化成本。納米抗體的分子質(zhì)量小、結(jié)構(gòu)簡單，能被單個基因編碼，利用基因工程能在酵母菌等微生物中大量表達。
耀海生物可提供納米抗體高表達菌株的篩選與發(fā)酵工藝開發(fā)服務，采用高密度發(fā)酵，利用畢赤酵母PAOX1誘導表達納米或PGAP組成型表達10余種不同納米抗體，表達量可達到10 g/L以上。
哺乳動物細胞表達系統(tǒng)能夠指導蛋白質(zhì)的正確折疊，提供復雜的N型糖基化和準確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能，因而表達產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學功能方面，接近于天然的高等生物蛋白質(zhì)分子。
耀海生物可利用哺乳動物細胞CHO系列細胞，通過瞬轉(zhuǎn)方法或構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株來表達多種不同納米抗體。利用CHO系列細胞瞬轉(zhuǎn)表達納米抗體，表達量可達20mg/L；利用CHO系列細胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株表達納米抗體，表達量可達15mg/L。
由客戶提供納米抗體基因序列或氨基酸序列，自主選擇表達宿主細胞，耀海生物提供從基因合成至納米抗體表達與純化、及規(guī)模化生產(chǎn)的一站式納米抗體研發(fā)生產(chǎn)服務。
| 步驟 | 服務內(nèi)容 | 周期 | 交付 |
| 納米抗體表達工程菌構(gòu)建（可以選擇畢赤酵母，大腸桿菌或者哺乳動物細胞） | 1.大腸桿菌表達系統(tǒng)（胞質(zhì)或周質(zhì)空間表達） 2.畢赤酵母表達系統(tǒng)（可以選用甲醇誘導型表達系統(tǒng)PAOX1或者組成型表達系統(tǒng)PGAP） 3.哺乳動物表達系統(tǒng)（通過瞬轉(zhuǎn)或者穩(wěn)轉(zhuǎn)來表達納米抗體） |
大腸桿菌1-2周（不包括基因合成周期） 畢赤酵母2-3周 哺乳動物瞬轉(zhuǎn)1-2周 穩(wěn)轉(zhuǎn)株2個月左右 |
純化得到的納米抗體，純化抗體檢測報告SDS-PAGE，SEC-HPLC（選做）、RP-HPLC（選做）和CE-SDS（選做）純度分析方法 |
| 小量表達純化（標簽） | 對構(gòu)建的工程菌納米抗體表達，對1L表達體積的蛋白進行純化（推薦加標簽）。 | 2-3周 | |
| 大規(guī)模表達純化 | 大規(guī)模發(fā)酵納米抗體樣品，同時對于發(fā)酵的納米抗體進行表達純化。 | 5-8周 |
成熟的納米抗體表達純化平臺，以豐富的技術(shù)及項目經(jīng)驗，提供一站式服務。
強大的技術(shù)服務團隊，具備豐富生物學技術(shù)背景，以博士為主導的表達純化平臺，提供一對一專項技術(shù)服務。
具備穩(wěn)定的原核細胞E.Coli 、真核畢赤酵母及哺乳動物細胞CHO等納米抗體表達平臺，客戶可根據(jù)需求靈活選擇表達平臺，減少試錯成本。
具備深厚納米抗體質(zhì)量評價體系經(jīng)驗，建立SDS-PAGE、SEC-HPLC、RP-HPLC及基于毛細管電泳的CE-SDS等多種純度分析方法。
豐富納米抗體純化經(jīng)驗，積累親和層析、離子層析、疏水層析等多種純化方式，可對不同純化方案靈活組合，實現(xiàn)純度≥98%。
可提供7-2000L的服務規(guī)模。
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